病毒清除驗證是藥物開發(fā)中最為關鍵的步驟之一，為新藥臨床研究審批（IND）和生物制品上市申請（BLA）提供關鍵性的支持。這種驗證的目的是確保病毒清除工藝的有效性，即該工藝能夠有效地消除病毒。病毒清除驗證有助于確定病毒清除工藝的有效性，以及病毒清除工藝是否能夠有效地阻止病毒的傳播。此外，驗證還可以確定病毒清除工藝的有效時間，以及清除病毒所需的時間，還有效比例和所需比例。

動物源性醫(yī)療器械，根據(jù)《動物源性醫(yī)療器械注冊技術審查指導原則》(2017年修訂版)，申請動物源性醫(yī)療器械的注冊申報，所提交的研究資料中需包含對生產(chǎn)過程中滅活和去除病毒和/或傳染性因子工藝過程的描述及有效性驗證數(shù)據(jù)或相關資料。

1）選擇指示病毒：選擇1-2種具代表性的DNA/RNA病毒，如腺病毒、腸道病毒等。
2）制備病毒懸浮液：調整病毒懸浮液濃度為107-108 TCID50/ml。
3）接種指示病毒：取醫(yī)療器械樣本，接種100μl病毒懸浮液，室溫條件下吸附30 min。
4）工藝處理：進行病毒滅活/去除工藝處理，包括實驗組和病毒接種的空白對照組。
5）病毒含量測試：使用細胞培養(yǎng)法、PCR法檢測處理前后樣本中病毒含量。
6）加速老化：37 ℃條件下加速老化處理樣本，樣本期末進行病毒含量復測。
7）重復驗證：調整工藝參數(shù)，重復驗證測試，最終確定優(yōu)化方案。
8）統(tǒng)計學分析：使用t檢驗等方法分析比較不同組別之間結果。

1）選擇指示病毒,調制不同病毒載量的原液(例如107、106、105 TCID50/ml)。
2）設置多個時間梯度點(例如5min、10min、15min...)，在每個時間點取樣。
3）在上述不同病毒載量和不同時間梯度取樣點，依次進行病毒滅活處理。
4）利用細胞培養(yǎng)法定量檢測每個樣本病毒的殘余含量。
5）將各時間點的病毒殘余量繪制曲線，反映不同處理時間下的病毒減少趨勢。如果曲線呈指數(shù)下降，則表明該滅活方法符合一階滅活動力學規(guī)律。
6）通過曲線計算D值，即減少90%病毒需的處理時間。D值可用于評估滅活效率。
7）最后，確定Z值，即滿足安全清除病毒的最大處理時間或次數(shù)。

YY/T 0771.3-2009/ISO 22442-3:2007 動物源醫(yī)療器械 第3部分：病毒和傳播性海綿狀腦?。═SE）因子去除與滅活的確認
YY 0970-2023 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 一次性使用動物源性醫(yī)療器械的液體化學滅菌劑  醫(yī)療器械滅菌過程的特征、開發(fā)、確認和常規(guī)控制的要求
《血液制品去除/滅活病毒技術方法及驗證指導原則》（國藥監(jiān)注〔2002〕160號）
《動物源性醫(yī)療器械注冊技術審查指導原則》(2017年修訂版)