化妝品防腐挑戰(zhàn)試驗(yàn)就是用來測(cè)定防腐劑有效抗菌的最低濃度，是用來決定化妝品配方中防腐劑的用量。無論是化妝品新配方的開發(fā)或現(xiàn)有的產(chǎn)品，以及新防腐劑的開發(fā)使用，均應(yīng)作化妝品防腐挑戰(zhàn)試驗(yàn)。
化妝品為什么要添加防腐劑？
所有的化妝品在生產(chǎn)和消費(fèi)者使用過程中都面臨著受到微生物污染的可能。大多數(shù)化妝品的制造原材料不是無菌的，但生產(chǎn)過程中沒有采用無菌程序，沒有滅菌過程，而且常常裝在多次使用過的包裝容器內(nèi)，這就可能造成微生物的一次污染。
二次污染是很難避免的，只能從加強(qiáng)防腐能力和減少細(xì)菌入侵著手，如選擇合適的防腐體系、封閉良好的包裝。產(chǎn)品的微生物污染不僅影響產(chǎn)品的功能和穩(wěn)定性，而且最重要的是影響使用時(shí)的安全性，使用污染了的產(chǎn)品會(huì)給消費(fèi)者造成健康威脅，因此在化妝品中常添加不同種類的防腐劑來防止微生物的大量繁殖，化妝品中防腐劑的存在減少了微生物存在的幾率。
為什么要做化妝品防腐挑戰(zhàn)試驗(yàn)？
在《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版中的規(guī)定，化妝品準(zhǔn)用的防腐劑有51項(xiàng)，，規(guī)范中包括了各項(xiàng)準(zhǔn)用防腐劑的中英文名稱及INCI（國際化妝品原料）名稱、最大允許使用濃度、允許使用范圍及限制條件、標(biāo)簽上需要標(biāo)注的使用條件和注意事項(xiàng)等。因此測(cè)防腐劑組分是化妝品檢測(cè)的一項(xiàng)常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。
化妝品防腐挑戰(zhàn)試驗(yàn)檢測(cè)方法
CTFA法
CIFA法用微生物包括：G+球菌如金黃色葡萄球菌；G-桿菌如大腸桿菌、銅綠假單胞菌；霉菌如黑曲霉、白色念珠菌。另外需氧產(chǎn)芽孢菌如蠟芽孢桿菌和枯草芽孢桿蘭等可選用。
CIFA使用的細(xì)蘭培養(yǎng)基包括NA、TSA（水解大豆瓊開培養(yǎng)基）、EA（瓊脂培養(yǎng)基）。適宜于真蘭生長的培養(yǎng)包括PDA（馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基）或MA（瓊脂培養(yǎng)基）。
當(dāng)菌體生長好后，可將細(xì)菌或酵母菌于5℃下斜面保存，霉菌可在室溫下斜面保存。在準(zhǔn)備接種物時(shí)，可以用肉湯或瓊培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌和酵母菌，收獲的菌體用于微生物檢驗(yàn)。
一般來講細(xì)菌的培養(yǎng)溫度為35-37℃，真菌采用23-28℃培養(yǎng)。CTFA推薦混合測(cè)試的樣品分別于0、1、23天（僅用于眼部的化妝品）、7、14和28天觀察微生物的生長情況，有部分檢驗(yàn)可能多于28天。
有些產(chǎn)品還進(jìn)行重復(fù)性的防腐試驗(yàn)來估計(jì)防腐劑在產(chǎn)中的適應(yīng)性，用某一特定的微生物防腐試驗(yàn)可以得出使防腐系統(tǒng)失去效力所需的檢驗(yàn)次數(shù)。
USP法
USP所用的微生物包括：金黃色葡萄球菌（ATcC6538）、大腸桿菌（ATCC8739）、鋼綠假單胞菌（ATC9027）、白色念珠菌（ATCC10231）、黑曲霉（ ATCC6404）。
USP采用的培養(yǎng)基是SCDA（大豆酪蛋白消化性瓊脂培養(yǎng)），因?yàn)樗梢允刮⑸锿⒌厣L。故USP方法建議用此培養(yǎng)基來活化菌種。將保存的菌種在固體培養(yǎng)基上接種。
根據(jù)這種方法，一種有效的防腐體系可以在14天后將細(xì)菌生存數(shù)減至初始濃度的0.1%，酵母和霉菌生存水平可能會(huì)更低。在試驗(yàn)后期階段，必須低于或維持這些既定的水平。
評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
USP認(rèn)為如果產(chǎn)品能做到以下幾個(gè)方面就說明防腐劑系統(tǒng)有效：
1. 在14天內(nèi)存活菌數(shù)達(dá)到初始菌數(shù)的0.1%；
2. 酵母菌和霉菌沒有菌絲生長；
3. 在28天保存試驗(yàn)中所有測(cè)試的微生物都保持或低于所設(shè)計(jì)的微生物水平。
CTFA的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)為如果產(chǎn)品能做到以下幾個(gè)方面，就說明防腐劑系統(tǒng)有效：
1. 在測(cè)試樣品保存7天內(nèi)細(xì)菌營養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)減少99.9%以上，并在試驗(yàn)期間繼續(xù)減少；
2. 酵母蘭和曹應(yīng)減少90%以上，并在試驗(yàn)期間繼續(xù)減；
3. 在整個(gè)試驗(yàn)期間可抑制芽孢的萌發(fā)。
